动物营养学报

2019, v.31(05) 2442-2450

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草鱼脂酰辅酶A合成酶4基因全长cDNA分子克隆及表达调控
Full-Length cDNA Molecular Cloning and Expression Regulation of Acyl Coenzyme A Synthetase 4 Gene in Grass Carp

韩振;高琦;许建和;易乐飞;申欣;丁祝进;程汉良;

摘要(Abstract):

本试验采用反转录PCR(RT-PCR)技术克隆草鱼脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)基因全长cDNA,利用实时荧光定量PCR技术研究ACSL4基因在草鱼大脑、心脏、脾脏、肝胰脏、肌肉、肾脏、肠系膜脂肪、前肠、中肠、后肠10种组织中的表达情况,并对投喂不同淀粉源饲料以及饥饿再投喂0、3、6、12和24 h后草鱼肝胰脏中ACSL4基因表达情况进行研究。结果显示:草鱼ACSL4基因cDNA全长2 418 bp,其开放阅读框2 121 bp,共编码706个氨基酸;草鱼ACSL4蛋白的氨基酸序列包含1个跨膜结构域、1个脂肪酸绑定基序和1个ATP/AMP绑定基序。草鱼ACSL4 mRNA在大脑和脾脏中相对表达量较高,显著高于其他组织(P <0.05),在肌肉中相对表达量最低;投喂不同淀粉源饲料对草鱼肝胰脏中ACSL4 mRNA相对表达量无显著影响(P>0.05);饥饿再投喂12 h后,草鱼肝胰脏中ACSL4 mRNA相对表达量达到最高值,显著高于其他时间段(P<0.05),24 h后恢复至最初水平。本试验从草鱼10种混合组织中克隆了ACSL4基因全长cDNA,其所编码的氨基酸序列的主要功能性位点脂肪酸绑定基序和ATP/AMP绑定基序在不同物种间高度保守;草鱼ACSL4基因主要在大脑和脾脏中表达;饲料中淀粉源对草鱼肝胰脏中ACSL4基因的表达无显著影响;在饥饿再投喂12 h后,草鱼肝胰脏中ACSL4 mRNA相对表达量达到最高值,随后显著下降至最初水平。

关键词(KeyWords): 草鱼;长链脂酰辅酶A合成酶4;分子克隆;表达调控

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(31272636);; 江苏省自然科学基金项目(BK2012664);; 江苏省优势学科建设工程项目(PAPD);; 江苏省研究生科研与实践创新计划项目(SY201701X)

作者(Author): 韩振;高琦;许建和;易乐飞;申欣;丁祝进;程汉良;

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DOI:

参考文献(References):

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